罗汉果皂甙的静态吸附曲线
    由图1 可知, 随着时间的递增, 大孔树脂D 101对罗汉果皂甙的吸附量也相应提高。且在120m in 内吸附基本达到饱和, 说明大孔树脂D 101可对罗汉果皂甙进行富集与纯化。

罗汉果皂甙的静态解吸曲线
    大孔树脂D 101对罗汉果皂甙的静态解吸作用见图2。结果表明, 温度影响罗汉果皂甙的解吸平衡, 温度越高, 解吸平衡所需时间越短, 解吸越快。但当温度较高时, 不易进行工艺操作, 综合有关因素, 选用40℃时进行洗脱, 利于工业化大规模制备。

罗汉果皂甙的动态吸附曲线
    由图3 可知,D 101大孔树脂对罗汉果皂甙有良好的动态吸附性能, 在较长时间内保持低浓度泄漏。直到洗脱液到30 mL 时, 流出液中罗汉果皂甙的浓度才达0. 036 m g/m L 左右。但是, 此时泄漏速度开始快速增加, 当洗脱液体积到达105 mL 时, 已达到吸附平衡, 此时大孔树脂的饱和动态吸附量为21 m göm L。

洗脱剂浓度的选择
    树脂吸附罗汉果皂甙后, 可选用对罗汉果皂甙溶解度较高的溶剂如甲醇、乙醇作洗脱剂。考虑到工业生产时, 甲醇的毒性较大, 因此选用乙醇作为解吸剂。图4 即为依次采用不同浓度乙醇溶液对罗汉果皂甙的洗脱效果图。结果表明, 10%～ 30% 的乙醇水溶液对罗汉果皂甙的洗脱能力较差, 洗脱液中皂甙的含量很少; 当乙醇浓度增至为40% 时, 随乙醇浓度的升高, 洗脱液中皂甙的含量逐渐增大, 以60% 乙醇洗脱液中皂甙的含量最高。随后, 再用70% 及80% 的乙醇溶液进行洗脱, 洗脱液中皂甙含量较少, 表明采用60% 的乙醇洗脱液便可将大部分的罗汉果皂甙解吸。因此, 优选的洗脱条件为: 在洗脱过程中, 先用蒸馏水及30% 乙醇水溶液进行洗脱以去除杂质, 再用对罗汉果皂甙洗脱能力最佳的60% 乙醇水溶液进行洗脱, 收集60% 乙醇洗脱液。

上样液pH 值对柱分离效果的影响
    在罗汉果皂甙的分离纯化中, 最难去除的是色素类杂质。图5 表明, pH 值呈碱性时, 大孔树脂对罗汉果皂甙的分离纯化效果较好, 且色素吸附少, 有明显的脱色效果, 其中以pH 值9. 0 时的分离效果最佳。是由于在一定碱性条件下, 罗汉果皂甙比较稳定, 以分子形式存在, 而色素类等杂质以离子形式存在, 同时由于大孔吸附树脂只对分子态物质有吸附, 对离子态的物质无吸附, 从而使罗汉果皂甙得以富集、纯化。

高含量罗汉果皂甙提取物的制备及分析
    综上所述, 罗汉果皂甙分离的最佳条件为: 上样液的pH 值为9. 0, 依次用pH 值9. 0 的氢氧化钠水溶液、蒸馏水、30% 的乙醇溶液及60% 的乙醇溶液进行洗脱, 收集60% 乙醇洗脱液, 浓缩并冷冻干燥, 可得高含量罗汉果皂甙提取物(M G I)。其主要成分的分析结果见表1。罗汉果皂甙V , 11-O-罗汉果皂甙V 及罗汉果皂甙IV 为罗汉果中主要的皂甙成分, HPLC 的分析结果表明, 经柱层析分离制备的罗汉果皂甙提取物(M G I)中这三种皂甙成分的含量均高于分离前的罗汉果皂甙水提物(M GC) , 三种皂甙成分的总含量达85. 70% , 尤其是罗汉果皂甙V 的含量达到69. 24% , 比分离前罗汉果皂甙V 的含量提高了41. 12% , 表明此方法可有效的分离纯化罗汉果皂甙, 显著提高提取物中罗汉果皂甙的含量。

结　论
    本研究表明, 大孔树脂D101 对罗汉果皂甙具有吸附快、解吸率高及洗脱率高等特点, 且再生简便, 可较好的分离、纯化罗汉果中的罗汉果皂甙。最佳分离条件为:上样液pH 值9. 0, 在40℃条件下依次采用pH 值9. 0 的氢氧化钠水溶液、蒸馏水、30% 乙醇及60% 乙醇进行洗脱, 收集60% 乙醇洗脱液, 浓缩并冷冻干燥。与常用的树脂分离方法相比, 本文建立的工艺通过改变上样液的pH 值及乙醇的洗脱浓度和条件, 便可显著提高提取物中罗汉果皂甙V 等主要皂甙成分的含量。同时, 为工业化生产提供了简单、快速的分离纯化方法。